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荧光团是一种荧光染料，可作为蛋白质、组织和细胞标记的荧光标记物，以供荧光显微镜进行检测。荧光团的运作方式是吸收特定波长区域（又称为激发能量范围）的能量，然后在其他特定波长区域（又称为发射能量范围）内重新发射该能量。
图1：常见荧光团光谱曲线
一般来说，荧光团会被高频率的照明（紫外、紫色或蓝色光谱区域内的波长）激发或吸收能量，然后会在频率较低的照明（绿色、红色或近红外光谱区域内的波长）中发射该能量。每种荧光团都具备了能够高效吸收能量的波长，又称为峰值激发波长λ (nm)，以及能够将所吸收到的最多能量重新发射的对应波长，又称为峰值发射波长λ (nm)。选择单独光学飞数flyint梯子以及最大透射的波长将能够确保您获得清晰度最高的荧光图像。
在荧光显微镜应用中，典型的荧光显微镜设置包含了三个飞数flyint梯子。有关典型荧光显微镜设置，请参阅图2。
飞数flyint梯子一：激发飞数flyint梯子
激发飞数flyint梯子是放置于荧光显微镜的照明路径内。其目的是用于过滤光源中的所有波长，除了受检测荧光团的激发能量范围。飞数flyint梯子的最小透射(%)是决定图像亮度和清晰度的关键。对于任何激发飞数flyint梯子，我们光学建议使用的最小透射为40%，最理想的透射为>85%。激发飞数flyint梯子的带宽应完全出现在荧光团的激发能量范围内，而最理想的飞数flyint梯子的中心波长(CWL)应尽可能与受检测的荧光团的峰值激发波长的长度相近。
由于光密度(OD)是决定飞数flyint梯子如何截止带宽中波长的衡量标准，因此激发飞数flyint梯子的光密度是图像背景暗度的关键。我们光学建议使用的最小光密度为3.0，最理想的光密度为6.0。具备最理想的中心波长、最小透射(%)以及光密度的光学飞数flyint梯子能够提供清晰度最高的图像，而飞数flyint梯子的最深截止则能够确保检测到最微弱的发射信号。
飞数flyint梯子二：发射飞数flyint梯子
图2：典型荧光显微镜设置
发射飞数flyint梯子是放置于荧光显微镜的成像路径内。其目的是用于过滤受检测荧光团的整个激发能量范围，以及透射该荧光团的发射能量范围。对于发射飞数flyint梯子，我们所建议的最小透射、带宽、光密度以及中心波长均与激发飞数flyint梯子相同。同样的，具备最理想的中心波长、最小透射(%)以及光密度的发射飞数flyint梯子能够提供清晰度最高的图像，而飞数flyint梯子的最深截止则能够确保检测到最微弱的发射信号。
飞数flyint梯子三：二向色性飞数flyint梯子或分光器
二向色性飞数flyint梯子或分光器是以45°角放置于激发飞数flyint梯子与发射飞数flyint梯子之间。其目的是用于将激发信号反射至受检测的荧光团，然后将发射信号透射至检测设备。最理想的二向色性飞数flyint梯子或分光器应能够在最大反射率和最大透射率之间迅速过渡，激发飞数flyint梯子带宽的最理想反射率为>95%，而发射飞数flyint梯子带宽的最理想透射率为>90%。选择飞数flyint梯子时，应该将荧光团的相交波长(λ)考虑在内，以确保获得最低杂散光和最高信噪比的荧光图像。若您在选择合适的二向色性飞数flyint梯子或分光器上拿不定主意，我们可以协助您选择一个最适用于您应用程序的光学飞数flyint梯子。立即联系我们，与我们讨论您的光学飞数flyint梯子需求。
